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食源性致病菌菌株保藏方法!

2019-01-21 09:55:07  1650 次浏览

中国微生物菌种查询网对于每个阳性样品,保存检出的食源性致病菌分离株,以便用于进一步的研究;分离菌株的编号应具有性,标识清楚;标签应防水、字迹耐冻;各省级实验室应建立食源性致病菌菌种库,妥善保存食源性致病菌分离株。

推荐常见的食源性致病菌菌株保藏方法有以下2种:

1.甘油冷冻保藏法

(1)保藏时间

本方法适合于菌种的长期保藏,保藏时间可达10年以上。

(2)方法

在充分加热混匀的BHI(副溶血性弧菌创伤弧菌保存时BHI中NaCl应加至3%)中加入甘油,使甘油达总体积的40%~50%,充分混合,分装至菌种保存管(2mL左右),121℃高压20min,备用;使用无菌棉签从非选择性平板上取新鲜纯培养菌落,加入装有BHI和甘油的无菌冻存管中,混匀后,-80℃保存(如果无-80℃冰箱,可选择-40℃保存,但保存效果较差)。

(3)注意事项

每株菌至少保存2管,分别放置在2个不同冻存盒中,一盒日常使用,另外一盒长期保存;使用时,取出相应的冻存盒,快速接种,以避免反复冻融;使用时,无菌操作,避免污染。

2.半固体保藏法

(4)保藏时间

本方法适合于短期菌种保藏,保藏时间一般为3~6个月。

(5)方法

无菌操作,挑取待保藏的菌种,穿刺接种约含5mL无菌半固体营养琼脂或半固体脑心浸液琼脂(副溶血性弧菌、创伤弧菌保存时BHI中NaCl应加3%)的小试管(约15mm×100mm)中。无菌操作吸取液体石蜡,加入已培养好的菌种上面,液体石蜡用量以高出半固体1cm 为准,使菌种与空气隔绝。将试管直立,置4℃或室温(副溶血性弧菌、创伤弧菌)下保存。

(6) 注意事项

副溶血性弧菌和创伤弧菌应放置室温保存。

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