冰醋酸加入烧瓶中，然后加入硫酸和异戊醇，搅拌下加热回流，当分馏柱顶端温度达到132℃时即反应完全。然后进行粗蒸馏，收集分馏柱顶136-143℃的馏分即为粗酯。粗酯用饱和食盐水洗两次，用氢氧化钠、碳酸钠混合碱液中和酸，再用氯化钙干燥后，加入精馏装置进行精馏，收集138-143℃的馏分即为成品。
1.乙酸异戊酯是重要的溶剂，能溶解硝化纤维素、甘油三松香酸酯、乙烯树脂、香豆酮树脂、松香、乳香、达马树脂、山达树脂、蓖麻油等。在日本，本品80%用作香料，有较强的果实香味，似梨、香蕉、苹果等香味。因此广泛用作各种食用果实香精。在烟用香精、日用化妆香精中也有适量应用。还用于人造丝、染料、人造珍珠、青霉素的提取等方面。
2.用作油脂、橡胶、硝酸纤维素、清漆、鞋油、油墨、防水漆、织物染色处理、药品萃取精制等的溶剂以及香料制造。
3.用作分析试剂，如作溶剂，萃取剂，色谱分析标准物质。还用作食品添加剂。还用于印染、照相业。
4.是制造喷漆溶剂、稀释剂的主要成分之一。
储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。应与氧化剂、酸类、卤素分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。
健康危害：对眼和粘膜有刺激作用，高浓度吸入可引起系统损害，甚至肝肾损害。急性中毒可出现急性结膜炎、咽喉炎、支气管肺炎、肺水肿。长期接触，有流泪、咳嗽、喉干、疲劳等症状，重者伴有、恶心、呕吐、胸闷、心悸、食欲不振等。可致皮肤干裂、皮炎或湿疹；可致贫血，嗜酸粒细胞增多，注意在使用的时候通风开窗。
燃爆危险：该品易燃，有毒，具刺激性。